Тест-система RIDASCREEN ® DES

Определение диэтилстильбестрола в мясе, желчи, моче, фекалиях, плазме/сыворотке крови и кормах

Стильбены, к группе которых относятся диэтилстильбестрол, диеноэстрол и гексоэстрол являются высокоэффективными синтетическими анаболическими стероидами, обладающие также сильной эстрогенной активностью. Было, однако, показано, что стильбены обладают выраженными канцерогенными свойствами. Использование стильбенов в животноводстве и птицеводстве приводит к их накоплению в продуктах животного происхождения и запрещено как в Российской Федерации, так и в странах Европы. Согласно документам Евросоюза, содержание стильбенов в моче, желчи и фекалиях не должно превышать уровня 2 мкг/кг.

Для определения стильбенов используются инструментальные физико-химические методы анализа, такие как жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ) и хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС). Эти методы, однако, предусматривают использование дорогостоящего оборудования, нуждающегося в высококвалифицированном обслуживании.

В последнее время в рутинной лабораторной практике широко применяется более удобный иммуноферментный метод анализа (ИФА, ELISA), являющийся официальным методом скрининга продуктов животного происхождения, принятым в странах Евросоюза.

Метод ИФА выгодно отличается высокой чувствительностью, специфичностью, доступностью, простотой запуска и поддержки. Постановка иммуноферментного метода анализа, в отличие от хроматографических методов, не требует значительных инвестиций в оборудование и персонал

Набор RIDASCREEN ^®DES представляет собой тест-систему для ИФА в комплекте с необходимыми реагентами, выпускается серийно под контролем системы качества ISO 9000 и предназначен для обнаружения сверхмалых остаточных концентраций диэтилстильбестрола в мясе, желчи, моче, фекалиях и кормах. Методика утверждена Департаментом ветеринарии Минсельхоза России за номером МУК 13-7-2/1873. Все реагенты, необходимые для выполнения анализа, включая стандартные растворы, входят в состав набора.

Спецификация:

Формат:

Стрипованный планшет, 96 лунок (12 стрипов по 8 лунок)

Стандарты:

0 / 25 / 50 / 100 / 200 / 400 нг/л

Пробоподготовка:

Моча, желчь: ферментативный гидролиз, очистка на колонках RIDA ^®C18
Мясо, фекалии: гомогенизация, экстракция, очистка на колонках RIDA ^®C18
Корма: гомогенизация, экстракция, фильтрование, разбавление
Плазма/сыворотка крови: экстракция, центрифугирование, разбавление

Затраты времени:

Пробоподготовка (10 проб):
от 10 минут до 4 часов
для разных проб

Анализ (не зависимо от количества проб): 15+3 часа

Предел обнаружения:

Мясо и фекалии:
Моча:
Желчь:
Корма:
Плазма/сыворотка крови:

0,1 мкг/кг (100 ppt)
0,2 мкг/л (200 ppt)
2 мкг/л (2 ppb)
2,5 мкг/кг (2,5 ppb)
0,1 мкг/кг (100 ppt)

Схема определения диэтилстильбестрола в мясе с помощью тест-системы RIDASCREEN ^® DES:

Измельчение пробы 1–2 минуты

Гомогенизация навески 5 г с 10 мл 67 mM фосфатного буфера 1 минута

Экстракция 3 г гомогената с 8 мл метилтретбутилового эфира 20 минут

Центрифугирование 10 минуты

Повторная экстракция и центрифугирование гомогената с 8 мл метилтретбутилового эфира 20 минут

Выпаривание 30 минут

Растворение сухого остатка в 1 мл 70% метанола, и обезжиривание петролейным эфиром 2 минуты

Центрифугирование 10 минут

Выпаривание 30 минут

Разбавление сухого остатка в 1 мл дихлорметана, добавление 3 мл 1Н раствора гидроксида натрия 1 минута

Встряхивание 5 минут

Добавление 300 мкл 6М фосфорной кислоты 1 минута

Очистка методом твердофазной экстракции 30 минут

Постановка иммуноферментной реакции 18 часов

Считывание результатов на ИФА-фотометре (450 нм) или визуально. Обработка результатов анализа 30 секунд